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        透析袋的使用方法的詳細介紹
        瀏覽次數:93發布日期:2023-09-08

        為防干裂,出廠前透析袋一般都經10%的甘油處理,透析袋中含有微量的硫化物、重金屬和一些具有紫外吸收的雜質,它們對蛋白質和其他生物活性物質有害,用前必須除去。新購進的普通型透析袋必須經過處理才能使用。處理方法如下。

        方法一:

        把透析袋剪成適當長度(10-20cm)的小段。

        在大體積(500ml)的2%(w/v)的碳酸氫鈉和1mmol/L EDTA2Na(pH=8.0)中將透析袋煮沸10min。

        用蒸餾水清洗透析袋。

        放在500ml的1mmol/L EDTA2Na(pH=8.0)中將之煮沸10min。

        冷卻后,置于30%或者50%的酒精中,放于4℃冰箱,必須確保透析袋始終浸沒在溶液內。從此時其取用透析袋必須戴手套。

        在使用前要用蒸餾水將透析袋里外加以清洗干凈。


        方法二:

        可先用50%乙醇煮沸1h,再依次用50%乙醇、0.01mol/L碳酸氫鈉和1mmol/L EDTA(pH=8.0)溶液洗滌,最后用蒸餾水沖洗即可使用。


        方法三:

        實驗要求不高的可以用簡易方法處理。用沸水煮5至10min,再用蒸餾水洗凈,即可使用。

        不過現在也有雜質含量極少,無需預處理,只需用去離子水清洗即可使用的即用型透析袋。這種透析袋具有特殊的生物技術膜,不含硫化物及金屬雜質。只是比普通型透析袋稍貴。

        3)透析袋濃縮樣品

        大多數情況下,透析袋純化的樣品會被稀釋。如果下游需要的樣品濃度比較高時,可能需要對樣品進行濃縮。透析袋本身濃縮的方法如下。

        (1)吹干濃縮法: 將蛋白溶液裝入透析袋內,放在電風扇下吹。此法簡單,但速度慢,且溫度不能過高,最好不要超過15℃。

        (2)透析袋濃縮法: 利用透析袋濃縮蛋白質溶液是應用的一種。將要濃縮的蛋白溶液放入透析袋(無透析袋可用玻璃紙代替),結扎,把高分子(6000-12000)聚合物如聚乙二醇(碳蠟)、聚乙/烯吡/咯、烷酮等或蔗糖撒在透析袋外即可。也可將吸水劑配成30%-40%濃度的溶液,將裝有蛋白液的透析袋放入即可。吸水劑用過后,可放入溫箱中烘干或自然干燥后,仍可再用。

        主要用于更換蛋白質的緩沖液,得有透析袋。不需要特殊的儀器。一般用得是PEG20000進行實驗,簡單,快速,對蛋白沒什么影響。

        此外,還有其他的樣品濃縮方法,如冷凍干燥濃縮法、超濾膜濃縮法等。


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